郭鑫 , 倪州献 , 罗建中 , 徐立安

1南京林业大学南方现代林业协同创新中心, 南京, 210037
2国家林业局桉树研究开发中心, 湛江, 524022
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15 卷, 第 5 篇   
收稿日期: 2016年06月27日    接受日期: 2016年07月10日    发表日期: 2017年02月28日

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以尾叶桉、细叶桉、粗皮桉为材料，采用L₁₆(4⁵)正交设计对SSR-PCR反应体系中的引物浓度、DNA浓度、Mg²⁺浓度、dNTP浓度和Taq酶含量5种因素的4个水平进行优化实验，确立了适合细叶桉、粗皮桉、尾叶桉SSR-PCR最佳反应体系，最终优化的SSR-PCR反应体系为：0.25 µmol/L引物、5 ng模板DNA、3.75 mmol/L Mg²⁺、0.4 mmol/L dNTP、1.5 U Taq酶、1 mL 10×PCR Buffer，双蒸水补齐10 µL；并利用优化的体系从74对SSR引物中筛选出12对多态性较高的引物，12对引物在3种桉树中均能扩增出条带，在尾叶桉、细叶桉、粗皮桉中的多态率分别为100％、92.86％、64.29％，为尾叶桉、细叶桉、粗皮桉的遗传多样性分析、品种鉴定、亲缘关系分析等提供了分子技术基础。

桉树；SSR；体系优化；引物筛选